[摘要] 目的 探讨神经前体细胞表达下调蛋白9(NEDD9)在结直肠癌(CRC)细胞侵袭和迁移中的作用及其分子机制。方法 将人CRC细胞(HCT116细胞)分为8组,其中,HCT116组细胞进行常规培养;HCT116+U0126(ERK通路抑制剂)组细胞孔中加入10μmol/L的U0126处理24h;shNC组、shNEDD9组(敲低NEDD9表达)、oeNC组、oeNEDD9组(过表达NEDD9)细胞分别感染shNC、shNEDD9、oeNC、oeNEDD9慢病毒;oeNC+U0126组、oeNEDD9+U0126组分别在oeNC组和oeNEDD9组细胞基础上加入10μmol/L的U0126处理24h。通过RT-qPCR检测各组细胞中NEDD9、E-cadherin、Vimentin、N-cadherin mRNA相对表达量,通过蛋白免疫印迹(WB)实验检测各组细胞中NEDD9和E-cadherin、p-ERK、ERK蛋白相对表达量;通过划痕实验和Transwell实验检测各组细胞迁移和侵袭能力。结果 划痕实验和Transwell实验结果显示,shNEDD9组细胞迁移率和侵袭率均显著低于shNC组,HCT116+U0126组迁移率和侵袭率均显著低于HCT116组(t=4.735~7.167,P<0.01)。RT-qPCR实验结果显示,与shNC组相比,shNEDD9组细胞中E-cadherin mRNA相对表达量显著升高,Vimentin和N-cadherin mRNA相对表达量显著降低(t=3.102~7.121,P<0.05)。WB实验结果显示,与shNC组相比,shNEDD9组细胞中E-cadherin蛋白相对表达量显著升高,p-ERK/ERK比值显著降低(t=3.054、4.851,P<0.05);与oeNC组相比,oeNEDD9组细胞中p-ERK/ERK比值显著升高,而oeNC+U0126组该比值显著降低(F=21.950,q=6.389、7.853,P<0.01);与oeNC+U0126组相比,oeNEDD9+U0126组细胞当中p-ERK/ERK比值显著升高(q=8.034,P<0.01)。结论 NEDD9可通过激活ERK通路促进CRC细胞EMT进程,进而促进其侵袭和迁移。
[摘要] 目的 探讨雷公藤红素对大鼠坐骨神经损伤后修复的影响及其作用机制。方法 将6周龄雄性SD大鼠分为A~C组和A1~C1组,其中A、A1组为假手术组,B、B1组大鼠行坐骨神经损伤,C、C1组大鼠行坐骨神经损伤后腹腔注射雷公藤红素(1 mg/kg)。在造模后第1、3、7、14、21、28天时检测A~C组大鼠坐骨神经功能指数(SFI),在第7天时解剖分离A1~C1组大鼠损伤侧坐骨神经组织,在第28
[摘要] 目的 探究水通道蛋白 5(AQP5)对晶状体上皮细胞(LECs)铁死亡的影响及其机制。方法 将永生化人 LECs(SRA01/04 细胞)分为空载体慢病毒对照组(A 组)、AQP5 稳定敲低组(B 组)、AQP5 稳定敲低联合线粒体靶向抗氧化剂(MT)处理组(C 组)。使用线粒体超氧化物检测试剂盒、增强型线粒体膜电位(MMP)检测试剂盒、线粒体通透性转换孔(mPTP)检测试剂盒检测各组细胞中线粒体活性氧(mtROS)、MMP 和 mPTP 荧光强度;通过线粒体脂质过氧化物荧光探针和线粒体 Fe2+ 探针分别检测各组细胞线粒体中脂质过氧化和 Fe2+ 水平;通过 Western blot 实验和免疫荧光染色实验检测各组细胞中 Nrf2、SLC7A11 和 GPX4 蛋白相对表达水平。结果 与 A 组相比,B 组细胞中 mtROS 水平和线粒体中脂质过氧化物、 Fe2+ 水平均显著升高,mPTP 荧光强度、MMP 和 Nrf2、SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量均显著降低;与 B 组相比,C 组细胞中 mtROS 水平和线粒体中脂质过氧化物、 Fe2+ 水平均显著降低,mPTP 荧光强度、MMP 和 Nrf2、SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量显著升高( F=5.66~46.17,q=2.88~9.32,P<0.05 )。结论 AQP5 缺失可通过抑制 Nrf2-SLC7A11-GPX4 轴诱导 LECs 发生铁死亡,维持或上调 LECs 中 AQP5 的表达水平可能成为防止晶状体混浊和治疗白内障的潜在策略。
[摘要] 目的 探讨 DNA 甲基转移酶 1(DNMT1) 和 DNMT3A 对胃癌细胞自噬的调控作用。方法 采用 Western blot 方法检测人胃黏膜上皮 GES-1 细胞和人胃癌细胞 AGS-EBV 中 DNMT1、DNMT3A、DNMT3B 蛋白的表达水平。按照实验要求将 AGS-EBV 细胞分为 A~D 组,将人胃癌细胞 GT38 细胞分为 a~d 组,A/a 组和 B/b 组细胞分别转染 siNC、siDNMT1、C/c 组和 D/d 组细胞分别转染 siNC、siDNMT3A。采用 Western blot 方法检测 A~D 组、a~d 组细胞中 DNMT1 或 DNMT3A、p62 表达水平及 LC3Ⅱ/I 比值;通过免疫荧光技术检测 A~D 组细胞中 LC3 自噬小体数量;通过透射电镜分析检测 A~D 组细胞中自噬溶酶体数量。结果 Western blot 方法检测结果显示,AGS-EBV 细胞当中 DNMT1、DNMT3A、DNMT3B 蛋白相对表达水平显著高于 GES-1 细胞(t = 2.947~6.695,P < 0.05);B 组与 A 组、b 组与 a 组相比,细胞中 DNMT1 蛋白相对表达水平显著降低,p62 蛋白相对表达水平及 LC3Ⅱ/I 比值显著升高(t = 2.828~126.800,P < 0.05);D 组与 C 组、d 组与 c 组相比,细胞中 DNMT3A 和 p62 蛋白相对表达水平显著降低,LC3Ⅱ/I 比值显著升高(t = 3.215~96.110,P < 0.05)。免疫荧光及透射电子显微镜观察结果显示,B 组细胞中 LC3 自噬小体数量和自噬溶酶体数量均显著高于 A 组,D 组显著高于 C 组(t = 3.200~5.701,P < 0.05)。结论 与 GES-1 细胞相比,胃癌细胞中 DNMT1 和 DNMT3A 的表达水平显著上调,胃癌细胞可能处于高甲基化状态;抑制胃癌细胞 DNMT1、DNMT3A 表达可增强细胞自噬水平。
[摘要] 目的 探讨核酪蛋白和细胞周期蛋白依赖性激酶底物 1(NUCKS1)基因对乳腺癌细胞增殖的影响及其与不同分子亚型乳腺癌的相关性。方法 基于 TCGA、GTEx 数据库分析乳腺癌患者肿瘤组织中 NUCKS1 的表达特征及其与患者预后关系。收集康复大学青岛中心医院 2017 年 1 月-2025 年 12 月确诊为乳腺癌患者的石蜡标本 88 例,其中三阴性乳腺癌(TNBC)34 例,HER2
[摘要] 目的 探讨双氢青蒿素对于人肝癌 HCCLM3 细胞黏附、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响及其机制。方法 将人肝癌 HCCLM3 细胞分为 A 组(对照组)、B 组(12.5 μmol/L 双氢青蒿素处理)、C 组(25.0 μmol/L 双氢青蒿素处理)、D 组(50.0 μmol/L 双氢青蒿素处理)、E 组[25.0 μmol/L 双氢青蒿素+50.0 μmol/L Janus 激酶 2(JAK2)/信号转导和转录激活因子 3(STAT3)通路抑制剂 AG490 处理]和 F 组(25.0 μmol/L 双氢青蒿素+0.5 μmol/L JAK2/STAT3 通路激活剂 colivelin 处理)。分别采用 CCK-8 实验、细胞黏附实验、Transwell 小室实验及蛋白免疫印迹(WB)实验对各组细胞的细胞活力、黏附、迁移、侵袭能力及相关蛋白水平进行分析和检测。结果 A~F 组的细胞活力、黏附、迁移、侵袭能力以及 JAK2/STAT3 通路和 EMT 相关蛋白的表达水平组间比较差异均具有显著性(F=22.119~783.032,P<0.05);B、C、D 组细胞的活力、黏附、迁移、侵袭能力以及 N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)表达水平和 p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3 比值低于 A 组( tLSD = 2.451~43.655,P<0.05),E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平高于 A 组( tLSD = 30.671~85.442,P<0.05);与 C 组相比,E 组相关指标差异更加显著( tLSD = 10.199~37.947,P<0.05),而 F 组趋势相反( tLSD = 5.882~61.518,P<0.05)。结论 双氢青蒿素可显著抑制人肝癌 HCCLM3 细胞的黏附、迁移、侵袭能力和 EMT 进程,可能与其对 JAK2/STAT3 通路信号转导的抑制作用有关。
[摘要] 目的 探讨支架蛋白 DLGAP1 的表达对乳腺癌细胞恶性表型的影响及其潜在作用机制。方法 将人三阴乳腺癌细胞系 MDA-MB-231-mCherry(简称 231)细胞分为实验组和阴性对照(NC)组,实验组 231 细胞转染靶向 DLGAP1 基因的特异性 siRNA(siDLGAP1),对照组 231 细胞转染相应 siNC。采用蛋白免疫印迹(WB)实验检测两组细胞中 DLGAP1、NR2B、p-NR2B 蛋白的相对表达水平,采用 CCK-8 法、划痕实验、Transwell 实验检测两组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果 WB 实验结果显示,实验组细胞的 DLGAP1、p-NR2B 相对表达水平显著低于 NC 组(t=4.70、17.46,P<0.01)。CCK-8 法、划痕实验、Transwell 实验结果表明,实验组细胞的增殖、迁移与侵袭能力均显著低于 NC 组(t=2.47~13.24,P<0.05)。结论 下调乳腺癌 231 细胞中支架蛋白 DLGAP1 的表达可抑制该细胞的恶性表型,其作用机制可能与调控 NR2B 的磷酸化水平有关,提示 DLGAP1 可能为乳腺癌治疗的潜在分子靶点。
[摘要] 目的 基于免疫原性细胞死亡(ICD)相关基因构建肝细胞癌(HCC)患者预后预测模型,并评估其临床转化价值。方法 从癌症基因组图谱(TCGA)数据库肝细胞癌(LIHC)队列中选择365例HCC患者,按7:3比例随机分为训练集和内部验证集;从基因表达综合(GEO)数据库GSE76427数据集中选择108例HCC患者作为外部验证集;收集上述患者肿瘤及配对癌旁正常组织的批量RNA测序数据,以及性
[摘要] 目的 探讨阿达木单抗治疗不同分型非全身型幼年特发性关节炎(juvenile idiopathic arthritis, JIA)患儿的效果及安全性。方法 回顾性分析2019年7月—2024年6月青岛大学附属医院诊治的82例非全身型JIA患儿的临床资料。根据国际风湿病联盟(ILAR)的分类标准,将患儿分为附着点炎相关性关节炎型(ERA)组45例,少关节型(oJIA)组18例,类风湿因子阴性多关节炎型[RF(一)pJIA]组10例,类风湿因子阳性多关节类型[RF(+)pJIA]组9例,患儿均每2周接受1次阿达木单抗治疗。比较4组患儿治疗前和治疗第4、12、24周时外周血中C反应蛋白(CRP)、红细胞沉降率(ESR)、活动性关节数目、幼年关节炎疾病活动评分27(JADAS27)以及不良事件的发生情况。结果 4组患儿的发病年龄比较差异具有显著性(F=14.97,P<0.05),性别分布差异无显著性(P>0.05)。4组患儿的受累关节部位比较差异有显著性( χ2=9.96~16.80,P<0.05 )。治疗前和治疗不同时间点,各组患儿的活动关节数目差异有显著性( χ2=65.32~212.90,P<0.05 );随着治疗时间的延长,4组患儿活动性关节数目呈下降趋势( χ2=76.40~241.50,P<0.05 )。治疗前4组患儿外周血CRP水平、ESR及JADAS27比较差异无显著性(P>0.05),4组患儿外周血CRP水平、ESR和JADAS27在不同治疗时间点比较及其与治疗前比较差异均有显著性(F=7.47~100.86,P<0.05)。随访期间各组患儿均未出现局部注射反应、严重感染、肝肾功能异常及胃肠道不适等不良反应。结论 阿达木单抗对不同分型非全身型JIA患儿均疗效显著,但相同治疗时间点不同分型JIA患儿的活动性关节数目存在差异,短期内应用阿达木单抗安全性良好。
[摘要] 目的 评估肿瘤组织中 ARID1A 突变对胃腺癌免疫治疗响应的预测效能,并构建临床预测模型。方法 选取 cBioPortal for Cancer Genomics 数据库中 777 例胃腺癌患者为探索队列,选取青岛大学附属医院 36 例术后接受帕博利珠单抗单药或帕博利珠单抗联合化疗治疗的胃腺癌患者为验证队列 1,选取 cBioPortal for Cancer Genomics 数据库
[摘要] 目的 采用三维斑点追踪成像(3D-STI)技术对完全性左束支传导阻滞(CLBBB)不同左心室射血分数(LVEF)患者的右心室收缩功能进行评估。方法 选择2024年6月-2025年5月于青岛大学附属医院确诊的CLBBB患者52例,根据患者的LVEF分为LVEF保留组(18例)、LVEF轻度减低组(20例)、LVEF减低组(14例),同期随机选取健康受试者35例作为对照组。采用二维超声心动图
[摘要] 目的 分析外耳道及颞骨血管瘤的临床特征,以提高该疾病的诊疗水平。方法 回顾性分析6例外耳道血管瘤及1例颞骨血管瘤患者的临床资料,对其临床特征、诊疗过程等进行总结。结果 外耳道及颞骨血管瘤发病较为罕见,通常表现为耳漏、听力下降、耳鸣、耳闷等症状,MRI示病变处 T1 加权像等信号, T2 加权像高信号。7例患者均采用手术治疗,且均通过术后病理确诊。术后1~3月复诊见创面愈合良好,无复发。随访6个月,7例患者均未诉明显不适。结论 外耳道及颞骨血管瘤临床罕见,临床特征不典型。MRI特征性表现( T1 等信号与 T2 高信号)对其鉴别诊断及术前评估具有重要价值,临床需根据病灶位置与范围个体化选择手术方式,规范诊疗可有效改善患者预后。
[摘要] 目的 探讨替罗非班治疗急性进展性脑梗死(acute progressive cerebral infarction, APCI)的效果及其安全性。方法 共选取88例APCI患者作为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(44例)与治疗组(44例)。对照组予以阿司匹林联合氯吡格雷双联抗血小板治疗,同时配合基础对症药物进行常规治疗;治疗组先予以替罗非班静脉持续泵注48 h,后续采用双联抗血小板方案联合常规药物对症治疗。分别评估两组患者治疗前及治疗第14天时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、Barthel指数差异;同步检测并对比两组患者治疗前、治疗第48小时、治疗第14天时血小板计数(PLT)、凝血酶原时间(PT)、血小板聚集率(PAgT)三项凝血血小板相关指标水平变化。结果 治疗前两组患者NIHSS评分、Barthel指数比较差异无显著性(P>0.05);治疗第14天时两组患者NIHSS评分显著低于治疗前,Barthel指数显著高于治疗前(t=15.03~14.95,P<0.05);两组患者治疗前后NIHSS评分、Barthel指数差值比较差异有显著统计学意义(t=2.45、2.68,P<0.05)。分组、时间、分组和时间的交互作用对患者的PAgT均有显著影响(F时间=132.45,F分组=42.18,F交互=95.67,P<0.05)。分组、时间、分组和时间的交互作用对患者的PT、PLT水平均无显著影响(P>0.05)。治疗组患者PAgT水平在治疗第48小时时显著性低于治疗前和治疗第14天时(P<0.05),且治疗第14天时与治疗前比较差异无显著统计学意义(P>0.05)。结论 替罗非班用于APCI临床治疗效果优异,能够有效缓解机体神经缺损症状,提高患者日常自理水平,且药物安全性可控。
[摘要] 目的 探讨慢性肾脏病(chronic kidney disease, CKD)患者消化道出血(GIB)的风险因素。方法 选择2023年4月—2025年10月青岛大学附属医院收治的335例CKD患者,依据是否发生GIB分为发生组(188例)和未发生组(147例)。收集并比较两组患者的年龄、性别、慢性病(高血压、肝硬化、糖尿病、心脑血管疾病)情况、药物(抗血小板药、抗凝药、激素)使用情况、透析治疗史、估算肾小球滤过率(eGFR)及血清肌酐、血尿素氮、血清白蛋白水平。采用单因素和多因素logistic回归分析CKD患者发生GIB的危险因素。并通过受试者工作特征(ROC)曲线分析有统计学意义的因素对GIB的诊断效能。结果 发生组与未发生组患者年龄、性别、eGFR、心脑血管疾病情况、糖尿病史情况及血清白蛋白水平、抗血小板药物使用史方面的差异具有显著性( χ2=4.458~40.964, Z=-4.443, t=-5.499, P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,高龄、男性、eGFR降低、血清白蛋白水平降低、抗血小板药物使用史为CKD患者GIB发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,年龄、性别、eGFR、血清白蛋白水平、抗血小板药物使用史联合预测GIB发生的曲线下面积为0.800。结论 高龄、男性、eGFR降低、血清白蛋白水平降低及抗血小板药物使用史是CKD患者GIB发生的独立危险因素。多指标联合预测模型预测效能良好,临床需开展多维度综合评估,实施个体化干预,以降低GIB发生风险,改善患者预后。
[摘要] 目的 探讨1例心-面-皮肤综合征(cardio-facio-cutaneous syndrome, CFCS)患儿的临床表型与遗传学特征,并结合文献复习评估生长激素治疗该患儿的疗效与安全性。方法 收集1例出生后体质量增长缓慢的CFCS患儿的临床资料,该患儿采用全外显子组测序(WES)明确诊断后进行了为期1年的长效重组人生长激素(rhGH)治疗,密切监测其生长参数及安全性指标,并对CFCS报道的文献进行系统性复习。结果 患儿,女,1岁4月龄,生后即存在喂养困难、生长迟缓,经营养指导及营养素补充干预后生长改善仍欠佳。患儿伴特殊面容、皮肤毛发发育异常及房间隔缺损,基因检测示BRAF基因c.1785T>G(p.F595L)杂合新发错义突变,确诊CFCS。予长效rhGH每周0.2mg/kg方案规律治疗1年,身长生长速度达12.5cm/年,身长Z评分从-3.2升至-2.1,体质量Z评分从-2.8升至-1.9,血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平从治疗前的<15μg/L提升到96.8μg/L。治疗期间及治疗后随访,患儿肝肾功能、血糖、甲状腺功能及肿瘤标志物均在正常范围,未见其他不良反应。结论 对于BRAF基因突变所致的CFCS患儿,rhGH治疗能有效促进身长线性增加,提高血液中IGF-1水平,短期应用安全性良好。但需要长期随访,以明确其风险获益比。
[摘要] 目的 构建基于多参数磁共振成像(MRI)的瘤内联合瘤周区域 Delta 影像组学的可解释性机器学习模型,并且评价其对乳腺癌患者新辅助治疗(NAT)后病理完全缓解(pCR)情况的预测效能。方法 选取 2018 年 10 月—2023 年 10 月于青岛大学附属医院和 2020 年 12 月—2023 年 12 月于烟台毓璜顶医院接受 NAT 后行手术切除的 254 例乳腺癌患者。其中,来自
[摘要] 睡眠障碍可能诱发或加重癫痫,而癫痫发作也可能干扰患者的睡眠状况。失眠、阻塞性睡眠呼吸暂停、发作性睡病、不宁腿综合征等睡眠障碍与癫痫共病的机制十分复杂,发作性睡病和癫痫可能具有相同的发病机制,非快速眼动睡眠相关异态睡眠与睡眠相关性过度运动性癫痫的诊断需相互鉴别。本文在阐述癫痫与睡眠障碍关系相关机制的同时,还阐述了睡眠结构对癫痫的影响,以期为有效控制癫痫发作和治疗该类患者的睡眠障碍提供参考。
患者,男,59岁,因“食欲下降1年余,半月内体重下降约2kg”,于2023年5月8日在我院门诊行超声内镜(EUS)检查,结果示十二指肠乳头旁黏膜下隆起,考虑囊性改变可能性大。为进一步诊治以“十二指肠肿物”收入院。患者既往糖尿病、高血压病史十余年,口服药物治疗,控制良好;4年前因胆结石行胆囊切除术,术后恢复可。入院查体未见明显阳性体征。入院时总胆红素54.77μmol/L,直接胆红素14.23μmo